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今日說明:試驗時怎樣挑選到適合自己試驗的抗體呢?
發布時間:2020-09-01   點擊次數:163次

抗體關於特異性的挑選:特異性的挑選首要需求考慮四個方麵:蛋白特異性、種屬特異性、試驗辦法特異性、符號物的特異性。

1、蛋白特異性:針對需求檢測的蛋白查找抗體,幾個細節要差異,重組表達的蛋白和內源性蛋白的檢測,對抗體的要求是不相同的,留心查看抗體說明書的檢測說明。假定重組蛋白不是全長表達,則需求留心抗體的免疫原區域是否在重組蛋白區域內。

2、種屬特異性:同種蛋白不同物種,有著或大或小的差異。現在大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或規劃多肽抗原的,依據蛋白的同源性的情況與其他種屬發作穿插反應。需求參照說明書注明的可反應種屬信息。一些稀有種屬很難找到抗體,可以經過蛋白的序列比對,挑選同源序列免疫的抗體。

3、試驗辦法特異性:現在運用抗體的試驗辦法有許多,不同的運用辦法過程中,由於對蛋白樣品的處理辦法不相同,蛋白的含量有差異,對抗體的辨認表位和效價要求都是不相同的。詳細的依據說明書注明的產品應用辦法進行挑選。

4、符號物的特異性一般依據試驗操作的試驗辦法不會運用帶有符號的一抗,比方WB、IHC等,都是經過二抗類的試劑符號抵達作用呈現的目的。但是依據儀器分析的一些試驗,或許就會運用到直接符號的一抗,比方流式試驗。那麽需求了解到自己行將運用的儀器能檢測到的熒光規模,不通的參數要求挑選對應的符號物。在免疫熒光雙標試驗中,需求選配不同的熒光物。

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