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在ELISA試驗中血清標本留意事項五要點
發布時間:2020-08-25   點擊次數:182次

大部分elisa 檢測均以血清為標本,那麽在ELISA試驗過程中血清標本有哪些留意事項呢?
    
血清具體留意事項:

1、要留意避免呈現嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為符號酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附於固相,然後與後邊參加的HRP底物反響顯色。

2、樣本的收集及血清別離中要留意盡量避免細菌汙染,一則細菌的成長,其所排泄的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發生分解效果;二則一些細菌的內源性酶如大腸杆菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應酶作符號的測定方法發生非特異性攪擾。

3、血清標本如是以無菌操作別離,則能夠在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的長期保存,應在-70℃以下。

4、冰凍保存的血清標本須留意避免因停電等形成的反複凍融。標本的反複凍融所發生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發生破壞效果,然後引起假陰性成果。此外,凍融標本的混勻亦應留意,不要進行劇烈振蕩,反複顛倒混勻即可。

5、血清標本在保存中如呈現細菌汙染所致的混濁或絮狀物時,應離心沉積後取上清檢測。

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